研域課堂：血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的詳解

ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測后成果偏高或偏低的主要原因，攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類：

1、外源性物質(zhì)
 
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不當(dāng)所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
 
1)標(biāo)本溶血
 
因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細(xì)胞破壞溶解時釋放出很多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，攪擾測定成果。
 
2)標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣，亦可發(fā)生非特異性顯色而攪擾測定成果。

2、內(nèi)源性物質(zhì)
 
常見的攪擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
 
1)類風(fēng)濕因子：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA試劑盒檢測中，可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
 
2)補(bǔ)體：ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補(bǔ)體C1q分子結(jié)合位點被露出出來，使C1q能夠?qū)⒍哌B接起來，然后形成檢測OD值偏高。
  
3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來，也能形成檢測OD值偏高。
  
此外血清中嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA試劑盒測定成果有攪擾效果。