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          上海研域生物小鼠ELISA試劑盒各環節中常見問題及解決方法

          發布時間: 2024-04-17  點擊次數: 1379次

          小鼠ELISA試劑盒以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。以靈敏度較高、特異性較好的特點在得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,


          下面分析
          小鼠ELISA試劑盒試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法

          一、選擇試劑

          選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。


          小鼠ELISA試劑盒



          二、加樣

          可能原因:

          1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣; 2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。

          解決辦法:

          1,標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。

          2,加樣后及時放入孵箱。

          3,加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

          4,如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

          5,ELISA試劑盒標本較多時,請分批操作。

          三、 孵育

          可能原因:

          1,孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗che底;

          2,孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗che底。

          解決辦法:

          1,貼封片或加蓋;

          2,按說明步驟嚴格控制操作時間。

          四、洗板

          可能原因:

          1,采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。

          2,采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不che底;洗板針堵塞,抽吸不wan全;洗板不暢,導致洗板效果差。

          3,反應板過多造成洗板等待時間長。

          解決辦法:

          1,ELISA試劑盒保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后zui hao在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;

          2,合理安排,或多用幾臺洗板機。


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