常用染料和試劑的配制與使用

1. 碘－硫酸法
  植物細胞細胞壁的主要成分是纖維素，纖維素被硫酸水解后，遇碘呈藍色反應。因此用碘－硫酸法可鑒定細胞壁的成分。
  試劑配制方法：
  1% 碘液 將1.5 克碘化鉀溶于100 毫升的蒸餾水中，待*溶解后，加入1 克碘，震蕩溶解。
  66.5% 硫酸 7 份濃硫酸加入3 份蒸餾水配制而成。配制時要將濃硫酸慢慢地加入水中，并不斷地用玻璃棒攪拌，否則會因急劇發熱，而使容器炸裂。
  2. 蘇丹Ⅲ反應
  蘇丹Ⅲ可將細胞中脂肪、栓質、角質染為桔紅色，因此可用此染料顯示出上述物質在細胞中的分布和位置。
  配制方法：將蘇丹Ⅲ （或蘇丹Ⅳ）染料0.1 克，溶于10 毫升95% 酒精中，然后加入10 毫升甘油。
  3. 間苯三酚反應法
  間苯三酚反應是植物顯微化學中確定木質化細胞壁的zui常用和zui簡單的方法。這一反應的原理是當間苯三酚在酸性環境下與細胞壁中的木質素相遇時，發生櫻桃紅色或紫紅色反應。其方法是將要鑒定的切片先用一滴1mol/L
  鹽酸浸透（間苯三酚要在酸性環境下才能與木質素起作用），然后滴一滴5-10% 間苯三酚的85% 酒精溶液，木質化的細胞壁即發生顏色反應。
  4．碘液測試淀粉法
  淀粉遇碘呈藍色反應，它是鑒定淀粉的zui常用方法。
  碘液配制方法：將2 克碘化鉀放入5 毫升蒸餾水中，加熱使其*溶解；然后加入1克碘，*溶解后用蒸餾水稀釋至300
  毫升，放入具有毛玻璃塞的棕色玻璃瓶中，置于暗處保存。
  測定淀粉時，可將上述溶液稀釋2-10 倍，使染色不致過深，效果更好。
  5. 壓片法常用的染料
  （1） 醋酸洋紅 為壓片法中zui常用的染料。
  配制方法是：先將100 毫升45% 醋酸水溶液放于燒瓶中煮沸，移去火焰，停止加熱。然后緩慢加入1 克洋紅粉末，全部加入后再煮沸1-2
  分鐘。此時可將一枚生銹鐵釘用棉線懸入溶液中約1 分鐘后取出（鐵為媒染劑）。靜置12 小時后經過過濾，放入磨口玻璃塞棕色瓶中保存備用。
  （2） 石炭酸---品紅 為近年創用的一種優良核染色劑，將細胞核和染色體染為紅紫色，細胞質一般不著色，背景清晰。
  其配制方法有二：
  配方Ⅰ：
  原液A：取3 克堿性品紅溶于100 毫升的70％酒精中（此液體可長期保存）。
  原液B：取10 毫升原液A，加入90 毫升5% 的石炭酸（酚）水溶液中（可保存兩周）。
  染色液：取55 毫升原液B 加6 毫升冰醋酸和6 毫升37% 甲醛。
  此染色液因含有較多的甲醛，可使原生質體硬化，而能保持其固有的形態。但也因此不易使組織軟化，因而不太適用于植物組織的染色體壓片染色（本染色液適于植物原生質體培養中使用）。在此基礎上加以改進的配方Ⅱ，則可普遍地用于一般植物組織的染色體壓片的染色。
  配方Ⅱ：
  取配方Ⅰ中的染色液20 毫或加80 毫升45% 醋酸和1.8 克山梨醇。
  染色液配制后為淡品紅色，如立即使用染色較淺。放置2 周后，染色能力顯著增強，而且放置時間越久，染色效果越好。
  6．鉻酸－硝酸離析法
  為了觀察一個細胞完整的立體形態結構，可以用一些化學藥品把細壁中的中層物質（果膠質）溶解，使細胞分離散開，便于觀察。
  離析前先把材料洗凈，用刀切成1-2 毫米寬的狹條（如葉片）或切成火柴棍粗細的長約1
  厘米的小條（如根或莖）。然后把切好的材料放進小玻璃瓶中，加入離析液（加入量約為材料的20 倍），塞緊瓶塞，放于30-40℃
  溫箱中。浸漬時間因材料性質而異，葉片和幼嫩的根莖組織3-4
  小時即可，而有些次生結構（如木質部）則需要更長的時間。離析情況應隨時檢查，檢查的方法是取少許離析材料，放在載玻片上，加一滴水，蓋上蓋玻片，然后用解剖針輕輕敲打，如果材料分離則表明浸漬時間已夠。浸漬時間超過一天以上時，應更換離
  析液一次。離析時間已夠的材料，用水洗凈后放入70% 酒精中保存。
  離析液配方：
  10% 鉻酸 1份
  10%硝酸 1 份
  兩種溶液應在使用時才混合，混合均勻后再使用。