ELISA試劑盒洗液運用準(zhǔn)則與洗滌方法

洗刷在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反響過程，但卻也決議著試驗的勝敗。ELSIA就是靠洗刷來到達(dá)分離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖。
Elisa試劑盒洗刷液運用準(zhǔn)則
1.某一項意圖洗液主張運用該試劑盒內(nèi)的洗液；
2.同一elisa試劑盒洗液用完了，主張選用同一批號的洗液；
3.同一批號的洗液也用完了，主張選用同一項意圖試劑洗液；
4.同一項意圖洗液用完了，主張運用該項目其他廠家的洗液；
5.同一項目一切廠家都用完了，主張選用同一系列項意圖洗液（比方甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測，歸于肝炎系列，急用時可以暫時混用）；
6.不主張國產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用，也更不主張不同系列項意圖洗液混用，這兩點都是因為洗液的裝備成分不同，特別是不同項意圖洗液（正規(guī)試劑廠家），首要組分都不太相同。
盡管對強(qiáng)陽性標(biāo)本影響不是很大，但關(guān)于臨界陽性陰性（灰區(qū)）標(biāo)本影響較大，所以不發(fā)起不同系列項目洗液混用。
ELISA試劑盒洗刷方法
（1）浸泡式
 a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液；
b.用洗刷液過洗一遍（將洗刷液注滿板孔后，即甩去）；
c.浸泡，行將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時刻不行隨意縮短；
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；
e.重復(fù)操作c和d，洗刷3-4次（或按說明規(guī)則）。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時刻。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
（2）流水沖刷式
ELISA試劑盒流水沖刷法開始用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時附接一特別裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比如淋浴，其洗刷作用更為*，且也簡潔、快速。已有試驗標(biāo)明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗刷作用更佳。